Caracterização funcional do PIN RNA do gene RASSF1 na linhagem celular HeLa

• Processo: 09/51644-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Sergio Verjovski Almeida
• Beneficiário: Renan Crocci de Souza
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 07/59168-7 - Caracterização funcional de RNAs intrônicos não-codificadores expressos no genoma humano, AP.TEM
• Assunto(s): Expressão gênica RNAs não codificadores
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Controle Expressao Genica | Pin Rassf1 | Rassf1 | Rna Nao-Codificador

Resumo

Trabalhos recentes têm revelado que uma porção significativa das mensagens transcritas dos organismos superiores é composta por RNAs não-codificadores (ncRNA), que, possivelmente, desempenham papéis definidos, mas até agora pouco elucidados. Nosso grupo tem caracterizado uma nova classe de longos ncRNAs intrônicos, expressos em orientação antissenso em relação ao mRNA codificador para proteína. Estudos em nosso laboratório, buscando ncRNAs possivelmente envolvidos na regulação de splicing, identificaram um RNA parcialmente intrônico (PIN RNA) antissenso ao gene RASSF1, denominado PIN RASSF1. Dados da literatura mostram que o locus do gene RASSF1 é capa/de gerar sete diferentes transcritos (Rassf1A-G) através do uso de diferentes promotores e de splicing alternativo. Uma das isoformas desse gene (RASSF1A) é um conhecido supressor tumoral e exerce diversas funções na célula como a manutenção da estabilidade genômica, modulação do ciclo celular e modulação da apoptose. Foi detectada uma correlação negativa entre a expressão do PIN RASSF1 e a expressão das isoformas RASSF1C e RASSF1A, indicando que este PIN pode regular a expressão de alguma dessas isoformas. O principal objetivo desta proposta é realizar ensaios para caracterizar funcionalmente o efeito desse ncRNA sobre o gene RASSF1. Para isto serão realizados experimentos de super-expressão do PIN e análise de seu efeito na velocidade de proliferação na linhagem celular HeLa, além de interferência de RNA (RNAi) para o ncRNA, a fim de validar a correlação negativa encontrada entre os transcritos do gene codificador da proteína e do PIN RASSF1. (AU)