Subclonagem, producao, purificacao e caracterizacao de "fibroblast growth factor 2" (fgf2) recombinante em escherichia coli.

• Processo: 05/58431-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Hugo Aguirre Armelin
• Beneficiário: Carla Renata Moreira
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 03/02717-8 - Desconstrução molecular do módulo de controle do ciclo celular em células adrenocorticais y1 de camundongo, AP.TEM
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ceculas Adrenocorticais Y1 | Cromarografia | E.Colli | Fibroblastos Balb373 | Hwm Fgf2 | Pproteina Recombinate

Resumo

Múltiplas formas de FGF2 têm sido demonstradas em muitos tipos celulares, onde essas diferentes isoformas de massas moleculares de 18, 22, 22.5, 24 e 34kDa são todas traduzidas por códons alternativos de inicialização de um mesmo mRNA. As quatro isoformas de HMW-FGF2 iniciam com códons CUG, enquanto que a isoforma de 18 kDa inicia-se em um códon de inicialização AUG. A sequência inteira da isoforma de 18 kDa está contida na porção carboxi-terminal das isoformas de HMW-FGF2, diferindo na porção amino-terminal da proteína. Enquanto a isoforma de 18kDa é encontrada principalmente nuclear (SLN). As funções biológicas das isoformas de HMW-FGF2 permanecem obscuras. O uso de proteínas recombinantes foi um grande avanço nos estudos de fatores de crescimento, pois permitiu a produção em larga escala destas proteínas, cujas concentrações são muito baixas em extratos de tecidos e fluídos tissulares. Este projeto tem como objetivo: a) produção de HMW-FGF2 de 22,5kDa recombinante; b) análise funcional desta isoforma em linhagens de camundongo (células adrenocorticais Y1 e fibroblastos Balb3T3. (AU)