Construção de deleção de TbeIF2K em T. brucei

• Processo: 10/11706-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Beatriz Amaral de Castilho
• Beneficiário: Bruno Ferreira de Souza
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 09/52047-5 - Regulação traducional mediada por EIF2 em eucariotos, AP.TEM
• Assunto(s): Síntese proteica Regulação traducional
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Regulação traducional | Síntese Protéica | Biologia Molecular

Resumo

A obtenção de parasitas deletados para as duas cópias desse gene será obtida a partir de construções já disponíveis no laboratório. Estas construções contém as regiões 5' e 3' não codificadoras, flanqueando genes para resistência a geneticina ou a higromicina, para permitir a inserção nas duas cópias do gene em transfecções distintas. Após a primeira transfecção e obtenção de parasitas resistentes `a geneticina, confirmação da correta inserção será feita por Southern blot. Parasitas com a inserção correta serão transfectados com a construção contendo o gene para resistência a higromicina. Os parasitas selecionados serão submetidos a Southern blot para confirmação da integração correta e deleção das duas cópias do gene