Expressao e purificacao das proteinas elf2alfa de t.brucei e gcn2 de camundongo.

• Processo: 03/12079-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2003
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Beatriz Amaral de Castilho
• Beneficiário: Leandro Salati D'Abronzo
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 02/12597-7 - Início da síntese protéica em eucariotos: mecanismos e regulação, AP.TEM
• Assunto(s): Expressão de proteínas Síntese proteica Quinases Cristalografia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalografia | Expressao De Proteinas | Fator De Inicio De Traducao | Quinase | Sintese Proteica

Resumo

A atividade do fator de início de tradução elF2 é um dos principais pontos de regulação da síntese proteica em eucariotos. A fosforilação da subunidade alfa de elF2 leva ao bloqueio da troca de GDP por GTP, ligado a elF2, promovida pelo fator elF2B. Quatro quinases são conhecidas que especificamente fosforilam o resíduo Ser51 de elF2alfa. Dentre elas, Gcn2 está presente de leveduras a mamíferos, e é ativada principalmente pela falta de aminoácidos, através da ligação a tRNA's não aminoacilados. Neste projeto, pretende-se expressar em E. coli e purificar em grande escala as proteínas elF2alfa de Trypanosoma brucei, e Gcn2 de camundongo, as quais serão empregadas em estudos estruturais por cristalografia. Adicionalmente, a proteína Gcn2 purificada será empregada para produção de anticorpos. (AU)