Padronização e aplicação de kits de solubilidade de proteínas para estudos estruturais por Ressonância Magnética Nuclear

• Processo: 08/09852-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2009
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Ana Carolina de Mattos Zeri
• Beneficiário: Camila Cristina Sanchez
• Instituição Sede: Associação Brasileira de Tecnologia de Luz Síncrotron (ABTLuS). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/14138-2 - Center for Structural Molecular Biotechnology, AP.CEPID
• Assunto(s): Biologia estrutural Proteínas Ressonância magnética nuclear
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia Estrutural | Proteinas | Ressonância Magnética Nuclear | Ressonância Magnética Nuclear

Resumo

As proteínas "Protein Activator of PKR" (PACT) e "ds-RNA-dependent Protein Kinase" (PKR) fazem parte de uma família de proteínas que se ligam a RNA dupla fita (dsRNA). Ambas são expressas em baixos níveis em diversos tipos celulares, e estão envolvidas no processo de resposta imune diante de infecções virais. PACT possui 3 domínios: na região N-terminal estão presentes dois domínios de ligação a dupla fita de RNA, e na região C-terminal está presente o domínio de ativação da PKR. Este trabalho tem como objetivo maximizar a solubilidade e estabilidade dos domínios de PACT contribuindo, assim, com o projeto de resolução da estrutural por Ressonância Magnética Nuclear e estudos funcionais dos domínios de ligação a RNA dupla fita (dsRBD1/M1 e dsRBD2/M2) e do domínio de ativação de PKR (M3) da proteína humana PACT. Os protocolos e a metodologia desenvolvidas poderão ser generalizados para outras proteínas, com a padronização de "kits" de solubilização e estabilização de amostras para estudos estruturais por RMN. (AU)