| Processo: | 07/56306-0 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de janeiro de 2008 |
| Data de Término da vigência: | 31 de dezembro de 2010 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos |
| Pesquisador responsável: | Marilis Do Valle Marques |
| Beneficiário: | José Freire da Silva Neto |
| Instituição Sede: | Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Caulobacter crescentus Expressão gênica |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Biblioteca De Transposon | Carencia De Ferro | Caulobacter Crescentus | Expressao Genica | Regulon Fur | Sequencia Fur Box |
Resumo A manutenção de níveis fisiológicos adequados de ferro requer a existência de sistemas eficientes de captação, dado sua escassa disponibilidade, e mecanismos que evitem seu acúmulo, devido seu potencial de gerar espécies reativas de oxigênio. Em bactérias, o mecanismo mais comumente observado para solucionar este aparente paradoxo é a manutenção de um grande número de. genes envolvidos em captação de ferro sob regulação de um repressor transcricional, a proteína Fur. Caulobacter crescentus, uma alfa-proteobactéria, Gram-negativa possui em seu genoma um grande número de genes potencialmente envolvidos em captação e regulação da homeostase deste metal. Neste trabalho será realizada uma análise global dos genes diferencialmente expressos em resposta à limitação de ferro, através da varredura de uma biblioteca do transposon mini-Tn5lacZ aleatoriamente integrado ao genoma de C. crescentus. As fusões das seqüências promotoras dirigindo a expressão do gene repórter lacZ serão identificadas por seqüenciamento e pesquisadas para presença de sítios de ligação da proteína Fur. A seqüência consenso obtida será utilizada para uma busca in silico nas regiões intergênicas do genoma completo para encontrar novos promotores regulados por Fur. A validação destes sítios de ligação será realizada por técnicas bioquímicas in vitro e por análise da expressão destes genes numa linhagem mutante Fur in vivo. (AU) | |
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