| Processo: | 09/52106-1 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de outubro de 2009 |
| Data de Término da vigência: | 31 de dezembro de 2012 |
| Área de conhecimento: | Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Patologia Animal |
| Pesquisador responsável: | Maria Lucia Zaidan Dagli |
| Beneficiário: | Gregory Mennecier |
| Instituição Sede: | Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Junções Gap Transformação celular neoplásica Conexinas |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Carcinogenese | Celulas Mamarias | Celulas Pulmonares | Conexinas | Juncoes Gap | Nnk |
Resumo Neoplasias mamárias e pulmonares são muito prevalentes no homem e, dentre os animais domésticos, também nos cães. É imprescindível que se elaborem modelos de estudo para estas neoplasias visando testar novos agentes preventivos e terapêuticos. Este projeto pretende estabelecer modelos de carcinogênese mamaria e pulmonar in vitro, e vai ao encontro de tendências atuais que preconizam evitar o uso de modelos animais sempre que possível. Serão utilizadas células epiteliais mamárias imortalizadas e não neoplásicas MCF10A, e também células epiteliais pulmonares E10 oriundas do ATCC (American Type Culture Collection). Ambas as linhagens serão transformadas com o carcinógeno do tabaco NNK. Será realizado o estudo da proliferação celular com o uso do marcador bromodeoxiuridina (BrDU) e por citometria de fluxo; será avaliada a viabilidade celular por meio do cristal violeta, será realizada a avaliação da morte celular e apoptose por meio do corante acridina orange e marcação da caspase 3 clivada. O estudo da capacidade de comunicação será feito por meio da microinjeção do marcador fluorescente Lucifer Yellow e quantificação, por sistema de análise de imagens, das células que adquiriram este marcador. Em seguida, serão estudadas a expressão das conexinas 26 e 43 por imuno-histoquímica e por PCR em Tempo Real. Espera-se desta forma caracterizar os modelos e permitir que sejam estudados, in vitro, agentes quimiopreventivos do câncer, e seus mecanismos de ação. (AU) | |
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