Construção de retrovírus utilizando sistema RevTet on para a expressão controlada da enzima condroitinase AC em lesões no sistema nervoso central

• Processo: 07/08091-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia
• Pesquisador responsável: Marimélia Aparecida Porcionatto
• Beneficiário: Caroline Mônaco Moreira
• Instituição Sede: Departamento de Bioquímica. Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Cicatriz Regeneração (fenômenos biológicos) Regeneração nervosa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cicatriz glial | condroitinase AC | lesão | regeneração | retrovirus | Neurociência

Resumo

Nas lesões no sistema nervoso central de mamíferos, os neurônios são incapazes de regenerar seus axônios e restabelecer as conexões funcionais. A falta de capacidade regenerativa é devida parcialmente à natureza inibitória do ambiente do local da lesão, a cicatriz glial. São encontrados na cicatriz glial astrócitos, células precursoras de oligodendrócitos, células da meninge e micróglia, que produzem altos níveis de moléculas que inibem o crescimento axonal, incluindo proteoglicanos de condroitim sulfato. Os proteoglicanos de condroitim sulfato (CSPGs - chondroitin sulfate proteoglycans) consistem de cadeias de condroitim-4-sulfato ou condroitim-6-sulfato covalentemente ligadas a diferentes esqueletos protéicos. Os proteoglicanos são degradados por enzimas denominadas condroitinases, que despolimerizam especificamente cadeias de condroitim sulfato do esqueleto proteico por meio de um mecanismo endolítico eliminativo. A remoção enzimática dessas cadeias aumenta a regeneração da fibra nervosa in vivo após lesões no trato nigroestriatal e na medula espinal após transecção dorsal. Este projeto tem por objetivo inserir o gene da condroitinase AC em vetor retroviral, RevTetOn, que permitirá o controle da expressão da enzima pela administração de tetraciclina ou doxaciclina. Como já foram observados efeitos colaterais de infecção por retrovírus no sistema nervoso central, como reação inflamatória local, os retrovírus contendo o gene da condroitinase AC serão utilizados para infectar células tronco obtidas da medula óssea, que posteriormente serão implantadas na região da lesão no sistema nervoso central, para que secretem condroitinase AC enzimaticamente ativa e de maneira controlada, facilitando a regeneração axonal e a recuperação das funções da área lesada. (AU)