Clonagem e expressão de duas terpeno sintases de citros

• Processo: 07/00058-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Marco Aurélio Takita
• Beneficiário: Mariana da Silva Caldeira
• Instituição Sede: Instituto Agronômico (IAC). Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios (APTA). Secretaria de Agricultura e Abastecimento (São Paulo - Estado). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Terpenos Óleos essenciais Laranja Síntese orgânica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Construcao | Proteina | Sistema Heterologo | Biologia Molecular de Plantas

Resumo

Terpenos constituem a maior e mais diversa classe de produtos naturais. São em sua maioria metabólitos secundários que constituem os óleos essenciais das plantas, apresentando uma ampla gama de funções que vão desde mediar processos básicos de interação com outros organismos quanto aplicações industriais como cosmética e farmacêutica. Dentre os diversos óleos essenciais, merece destaque o de citros, não apenas pelo aroma agradável mas também pela grande utilização na indústria. O Brasil destaca-se principalmente pela produção de óleo essencial de laranja doce que, por ser um sub-produto da produção de suco, torna o país o principal produtor mundial deste tipo de óleo no mundo. A síntese de terpenos é feita a partir de duas vias distintas, uma citoplasmática e outra plastidial. Ambas as vias produzem isopentenil difosfato que é convertido a dimetilalil difosfato. Estes são os precursores básicos da síntese de terpenos, que são transformados antes de serem processados por enzimas conhecidas como terpeno sintases. Estas enzimas produzem diferentes terpenos que são classificados de acordo com seu número de carbono. O Centro APTA Citros Sylvio Moreira do Instituto Agronômico de Campinas realizou um extensivo trabalho de sequenciamento de ESTs de citros, com ênfase em laranja doce, gerando o que hoje constitui-se no maior banco de sequências de DNA de citros existente no mundo. Um trabalho de garimpagem deste banco mostrou que todos os componentes das vias de síntese de terpeno em laranja doce, além de um grande número de sequências de terpeno sintases, estão presentes neste banco. Com o intuito de caracterizar algumas destas proteínas, este estudo propõe a clonagem e expressão de duas destas terpeno sintases de laranja doce em Escherichia coli. Este trabalho não apenas permitirá uma caracterização mais profunda destas proteínas mas também possibilitará um melhor entendimento dos mecanismos que regem a síntese dos óleos essenciais em citros, em um contexto mais amplo. (AU)