Clonagem e caracterizacao de celulas embrionarias de fibroblasto murino transformadas com genes de hpv16.

• Processo: 04/13209-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2005
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: Ana Paula Lepique
• Beneficiário: Fabiana de Godoy
• Instituição Sede: Instituto Ludwig de Pesquisa sobre o Câncer (ILPC). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 04/00749-2 - Interação entre HPV e o sistema imunológico em camundongos RAG-/- reconstituídos com células hematopoiéticas selvagens, AP.JP
• Assunto(s): Clonagem Transfecção
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Clonagem | Deteccao De Acicos Nucleicos | Deteccao De Proteinas | Fibroblastos Embrionarios | Transfeccao

Resumo

Este projeto visa a geração e caracterização de clones de firoblastos embrionários de camundongos C57BL/6 transfeciados permanentemente com vetores contendo os genes de HPV16 E5, E6, E7 e L1. Estes serão utilizados como apresentadores de antígeno para células de camundongos imunizados contra proteínas de HPV16, tanto diretamente no contexto MHC-I para células de memória CD8, como indiretamente se fornecidas como substrato para células apresentadoras de antígeno profissionais que apresentarão epítopos no contexto MHC-II para células de memória CD4, A aluna deverá transfectar células embrionárias de camundongos C57BL/6, selecionar clones positivos, manter e expandir estes clones e testar por técnicas de biologia molecular a presença do transgene, expressão do mRNA correspondente e da proteína. Este projeto é vinculado ao processo FAPESP 04/00749-2, já em andamento, e além de beneficiar o projeto do laboratório, dá â aluna oportunidade de aprendizado de técnicas básicas de cultura celular e biologia molecular. (AU)