Investigacao de mutacoes no gene arx na sindrome de west.

• Processo: 06/50586-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2007
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Claudia Aparecida Rainho
• Beneficiário: Daniela Zimbardi
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Mutação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Expansoes De Trinucleotideos | Gene Arx | Hipsarritmia | Mutacoes | Sindrome De West

Resumo

A síndrome de West se inicia no primeiro ano de vida e consiste de espasmos, atraso ou regressão no desenvolvimento neuropsicomotor e eletroencefalograma com hipsarritmia. Mutações no gene ARX no cromossomo X foram associadas a essa síndrome, das quais duas apresentam maior incidência, uma expansão de sete repetições em tandem GCG dentro de uma seqüência normal de 10 repetições localizadas no éxon 2, descrita como (GCG)10+7 e uma duplicação de 24pb também no éxon 2, denotada como 428-451 dup(24pb), ambas resultando em expansões de polialaninas. Este projeto pretende investigar a presença dessas mutações, em casos familial ou esporádico, e otimizar a metodologia de investigação das mesmas através da amplificação de um segmento que flanqueia as duas mutações, utilizando-se da técnica de PCR. Para contornar possíveis dificuldades na amplificação dessa região, devido a esta ser considerada uma ilha CpG e de os portadores dessas mutações serem hemizigotos, será empregada uma abordagem do tipo nested-PCR. As amostras serão submetidas à eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante e, se observado padrão anormal de migração das bandas, a caracterização das mutações será realizada através de duas estratégias: análise de RFLP e seqüenciamento direto. (AU)