Estudo molecular e funcional das isoformas N-domínio da enzima conversora de angiotensina I (ECA) de 65 kDa e 90 kDa (possível marcador genético de hipertensão) nas células mesangiais (cm) de ratos Wistar e SHR

• Processo: 03/02575-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2003
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2007
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Dulce Elena Casarini
• Beneficiário: Maria Claudina Camargo de Andrade
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 02/13290-2 - Isoforma (90 kDa) da enzima conversora de Angiotensina I, potencial marcador genético de hipertensão: processamento, caracterização molecular e funcional, e segregação genética, AP.TEM
• Assunto(s): Células mesangiais Sistema renina-angiotensina Hipertensão
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Celulas Mesangiais | Eca N-Dominio | Ratos Espontaneos Hipertensos | Ratos Wistar | Sistema Renina Angiotensina

Resumo

Em trabalho anterior na tese de Mestrado e Doutorado, MCC Andrade descreveu nas CM de ratos Wistar as ECAs com massas moleculares de 130 kDa, semelhante a somática e a de 65 kDa, uma isoforma N-domínio. Já para a CM de ratos SHR, foram descritas duas enzimas com massas moleculares de 65 kDa e 90 kDa (possível marcador genético de hipertensão) caracterizadas também como isoformas N-domínio da ECA; que foram co-localizadas no núcleo dessas células com angiotensina II e angiotensina 1-7. Desta forma, neste projeto estudaremos essas isoformas N-domínio buscando responder duas questões fundamentais: - Se estas enzimas são traduzidas de um RNAm específico transcrito a partir do gene da ECA do rim? Ou se elas são produzidas e excretadas depois de uma modificação pós-tradução (proteólise) da forma de alta massa molecular no rim ou na urina?. Para atingir tais objetivos estaremos identificando do RNA mensageiro, verificaremos degradação/ estabilidade, tráfego, a possível ligação dessas isoformas a outras proteínas, e o papel dessas enzimas no núcleo destas células. Se encontrarmos o RNAm, partiremos para clonagem e produção da enzima recombinante para que possamos expressá-las em larga escala. Estudaremos a estrutura das proteínas naturais e/ou recombinantes, tentando no futuro chegar à cristalização dessas isoformas que possibilitará a busca de novos inibidores capazes de auxiliar no tratamento da hipertensão. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ANDRADE, MARIA CLAUDINA CAMARGO DE; DI MARCO, GIOVANA SENO; TEIXEIRA, VICENTE DE PAULO CASTRO; MORTARA, RENATO ARRUDA; SABATINI, REGIANE ANGÉLICA; PESQUERO, JOÃO BOSCO; BOIM, MIRIAM APARECIDA; CARMONA, ADRIANA KARAOGLANOVIC; SCHOR, NESTOR; CASARINI, DULCE ELENA. Expression and localization of N-domain ANG I-converting enzymes in mesangial cells in culture from spontaneously hypertensive rats. American Journal of Physiology : Renal Physiology, v. 290, n. 2, p. F364-F375, Feb. 2006. (03/02575-9, 02/13290-2)

DE ANDRADE, MARIA C. C.; AFFONSO, REGINA; FERNANDES, FERNANDA B.; FEBBA, ANDREIA C.; DA SILVA, ISMAEL D. C. G.; STELLA, REGINA C. R.; MARSON, ODAIR; JUBILUT, GUITA N.; HIRATA, IZAURA Y.; CARMONA, ADRIANA K.; et al. Spectroscopic and structural analysis of somatic and N-domain angiotensin I-converting enzyme isoforms from mesangial cells from Wistar and spontaneously hypertensive rats. International Journal of Biological Macromolecules, v. 47, n. 2, p. 238-243, AUG 1 2010. (03/02575-9, 02/13290-2)