Estudo molecular e funcional das isoformas N-domínio da enzima conversora de angiotensina I (ECA) de 65 kDa e 90 kDa (possível marcador genético de hipertensão) nas células mesangiais (cm) de ratos Wistar e SHR

Resumo

Em trabalho anterior na tese de Mestrado e Doutorado, MCC Andrade descreveu nas CM de ratos Wistar as ECAs com massas moleculares de 130 kDa, semelhante a somática e a de 65 kDa, uma isoforma N-domínio. Já para a CM de ratos SHR, foram descritas duas enzimas com massas moleculares de 65 kDa e 90 kDa (possível marcador genético de hipertensão) caracterizadas também como isoformas N-domínio da ECA; que foram co-localizadas no núcleo dessas células com angiotensina II e angiotensina 1-7. Desta forma, neste projeto estudaremos essas isoformas N-domínio buscando responder duas questões fundamentais: - Se estas enzimas são traduzidas de um RNAm específico transcrito a partir do gene da ECA do rim? Ou se elas são produzidas e excretadas depois de uma modificação pós-tradução (proteólise) da forma de alta massa molecular no rim ou na urina?. Para atingir tais objetivos estaremos identificando do RNA mensageiro, verificaremos degradação/ estabilidade, tráfego, a possível ligação dessas isoformas a outras proteínas, e o papel dessas enzimas no núcleo destas células. Se encontrarmos o RNAm, partiremos para clonagem e produção da enzima recombinante para que possamos expressá-las em larga escala. Estudaremos a estrutura das proteínas naturais e/ou recombinantes, tentando no futuro chegar à cristalização dessas isoformas que possibilitará a busca de novos inibidores capazes de auxiliar no tratamento da hipertensão. (AU)