Produção de um soro antielapídico por imunização genética

• Processo: 09/10328-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Paulo Lee Ho
• Beneficiário: Henrique Roman Ramos
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Transcriptoma Micrurus corallinus Biotecnologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: antisoro | Micrurus corallinus | Transcriptoma | Vacinas DNA | Biotecnologia

Resumo

As cobras corais (gênero Micrurus) são os representantes nas Américas das serpentes da família Elapidae, que na Ásia, África e Austrália apresentam-se em centenas de gêneros, muito estudados por razões de saúde pública e interesse farmacológico. Ainda que menos representativas no Brasil, as corais causam acidentes fatais em humanos e seus venenos são pouquíssimo explorados. Essa deficiência se deve basicamente a baixa disponibilidade de veneno desse animal, relacionada à dificuldade de sua manutenção em cativeiro e à pequena quantidade de veneno produzido. Isso leva a uma limitação da produção de soro antielapídico, insuficiente para a demanda em nível nacional. Recentemente, com a caracterização do transcriptoma da glândula de veneno de Micrurus corallinus por nosso grupo, foram geradas Expressed Sequence Tags (ESTs) a partir de clones escolhidos aleatoriamente de bibliotecas de cDNAs. Após tratamento bioinformático, agrupamento de sequências similares (clustering), anotação e análise qualitativa e quantitativa dos clusters, identificamos possíveis candidatos a antígenos para um soro hiper-imune, que venha a contornar o problema da falta de veneno para a produção de soro.Agora, pretendemos utilizar estes e outros candidatos antigênicos para a geração de um anti-soro por diferentes metodologias. Os cDNAs selecionados serão subclonados em vetores de expressão procariontes e eucariontes. Em sistema procarionte (E. coli), as toxinas recombinantes serão expressas e purificadas para imunização e ensaios de caracterização biológica/bioquímica. Já as construções em vetores para mamíferos serão introduzidas diretamente em camundongos (imunização genética) para a produção in vivo de seus produtos, que deverão ser apresentados ao sistema imune do animal com consequente geração de anticorpos. A produção de anticorpos será avaliada quantitativa (título) e qualitativamente (isotipagem) contra os antígenos recombinantes e/ou nativos do veneno. Uma avaliação da capacidade neutralizante dos anti-soros será feita por desafio contra o veneno. Os resultados serão avaliados dentro de um contexto de possível escalonamento para animais de grande porte. Dessa forma, esperamos utilizar o conhecimento da diversidade de toxinas do veneno das cobras corais no desenvolvimento de um soro antielapídico auto-sustentável e independente da disponibilidade de animais para o fornecimento dos antígenos.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

RAMOS, HENRIQUE ROMAN; VASSAO, RUTH CAMARGO; DE ROODT, ADOLFO RAFAEL; SANTOS E SILVA, ED CARLOS; MIRTSCHIN, PETER; HO, PAULO LEE; SPENCER, PATRICK JACK. Cross neutralization of coral snake venoms by commercial Australian snake antivenoms. CLINICAL TOXICOLOGY, v. 55, n. 1, p. 33-39, JAN 2017. (09/10328-8)

RAMOS, HENRIQUE ROMAN; JUNQUEIRA-DE-AZEVEDO, INACIO DE LOIOLA M.; NOVO, JULIANA BRANCO; CASTRO, KAREN; DUARTE, CLARA GUERRA; MACHADO-DE-AVILA, RICARDO A.; CHAVEZ-OLORTEGUI, CARLOS; HO, PAULO LEE. A Heterologous Multiepitope DNA Prime/Recombinant Protein Boost Immunisation Strategy for the Development of an Antiserum against Micrurus corallinus (Coral Snake) Venom. PLoS Neglected Tropical Diseases, v. 10, n. 3, MAR 2016. (09/10328-8)