Mecanismos pro-inflamatorios envolvidos na ativacao dos receptores p2x3 pelo atp endogeno.

• Processo: 08/53589-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2008
• Data de Término da vigência: 09 de março de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Geral
• Pesquisador responsável: Carlos Amilcar Parada
• Beneficiário: Maria Cláudia Gonçalves de Oliveira
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Citocinas Trifosfato de adenosina Inflamação Nociceptores
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Atp | Celulas Residentes | Citocinas | Inflamacao | Nociceptores | Receptores P2X3

Resumo

Embora em condições normais a expressão do receptor purinérgico P2X3 pareça ocorrer apenas nos neurônios aferentes primários, recentemente demonstramos que, na resposta inflamatória induzida pela carragenina, a ativação do receptor P2X3 contribui expressivamente não apenas com a hiperalgesia, mas também com a liberação de citosinas pró-inflamatórias. Portanto, o objetivo deste projeto é investigar o mecanismo pelo qual os receptores P2X3 modulam a produção de citosinas. Para tanto será avaliada a contribuição da ativação do receptor P2X3 neuronal ou presente em células residentes (macrófagos, mastócitos, fibroblastos e queratinócitos) na liberação das citosinas pró-inflamatórias TNF-alfa, IL-1 beta e CINC-1. Inicialmente, investigaremos se o tratamento com capsaicina, que destrói as fibras C (TRPV-1 sensíveis), reduz a liberação de TNF-alfa, IL-1 beta e CINC-1 no tecido subcutâneo da pata de ratos. Confirmada essa hipótese, verificaremos se o tratamento intratecal com antisense contra receptor P2X3 reduz a liberação de TNF-alfa, IL-1beta e CINC-1 Além disso, investigaremos o papel dos mediadores inflamatórios neuronais, substância P e CGRP, na liberação das citosinas mediada pela ativação do receptor P2X3. Por imunofluorescência, investigaremos a expressão dos receptores P2X3 em macrófagos, mastócitos, queratinócitos e fibroblastos do tecido subcutâneo da pata de ratos após inflamação induzida pela administração subcutânea de carragenina. Uma vez demonstrada a expressão do receptor P2X3 nessas células, investigaremos se a administração subcutânea do antagonista de receptor P2X3, A-317491, diminui a liberação das citosinas induzidas pela carragenina na pata de ratos cujas fibras C (TRPV-1 sensíveis) foram previamente destruídas pela capsaicina. Finalmente, investigaremos in vitro se a ativação do receptor P2X3 nas células (macrófagos, mastócitos, fibroblastos e/ou queratinócitos) que expressaram esse receptor induz liberação TNF-alfa, IL-1 beta e CINC-1. (AU)