Clonagem e expressão do gene penicilina G acilase de B. megaterium em E. coli e no próprio B. megaterium

• Processo: 03/07340-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2003
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Heloisa Sobreiro Selistre de Araújo
• Beneficiário: Laura Marina Pinotti
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Clonagem Expressão gênica Antibióticos Escherichia coli Penicilina G
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Antibioticos | B. Megaterium | Clonagem | E. Coli | Expressao | Penicilina G Acilase

Resumo

A principal aplicação da penicilina G acilase (PGA) é na hidrólise da penicilina G e cefalosporina para a produção dos ácidos 6-aminopenicilânico (6-APA) e 7-aminocefalosporânico (7-ACA), que são compostos chave na produção industrial de antibióticos b-lactâmicos semi-sintéticos, tais como ampicilina, amoxicilina e cefalexina. Esses antibióticos também podem ser obtidos através de reações enzimáticas ("verdes") entre amidas ou ésteres com o ácido 6- aminopenicilânico. As principais reações do processo são catalisadas pela enzima PGA. Devido a grande importância dessa enzima na indústria farmacêutica, este trabalho tem os seguintes objetivos: 1. Clonagem do gene PGA de B. megaterium em E. coli e no próprio B. megaterium 2. Produção de PGA por E. coli e B. megaterium recombinantes. Cabe observar que o 6-APA utilizado nos processos de produção de antibióticos semi-sintéticos aqui no Brasil é oriundo do exterior. Os processos convencionais (fermentação com linhagens selvagem) de obtenção da enzima PGA ainda não resultam em produções satisfatórias. A obtenção de linhagens clonadas é uma alternativa para a obtenção de linhagens superprodutoras. Sendo assim, justificam-se os objetivos deste trabalho. (AU)