Estudos de mutacao sitio dirigida na molecula de desintegrina recombinante disba(delta-32)

• Processo: 08/53108-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Dulce Helena Ferreira de Souza
• Beneficiário: Ariele Cristina Moreira
• Instituição Sede: Centro de Ciências Exatas e de Tecnologia (CCET). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Adesão celular Proteínas recombinantes Venenos de serpentes Metaloproteases Desintegrinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Adesao Celular | Desintegrinas | Metaloproteases | Proteina Recombinante | Veneno De Serpente

Resumo

No presente projeto Iremos abordar a questão do desenvolvimento de novos fármacos, estudando uma desintegrina-RGD recombinante de veneno de B. alternatus. Nossa proposta é dar continuidade aos estudos com a proteína DisBa-01, que foi obtida em estudos anteriores de forma recombinante e teve sua atividade anti-metastática e anti-trombótica comprovada in vivo (Ramos, 2005). Estudos preliminares por modelagem molecular indicam que a região N-ierminal da DisBa-01 não participa da interação da desintegrina com o receptor (integrinaβ3). Recentemente nós estudamos a minimização da molécula DisBa-01 e obtivemos duas moléculas diminuídas de 32 e 36 resíduos de aminoácidos na região N-terminal da molécula. A análise da atividade de inibição de adesão celular das duas moléculas mutadas (chamadas DisBa(Δ1-32) e DisBa(Δ1-36)) revelou que elas mantiveram a atividade inibitória observada na molécula 'inteira' DisBa-01 (Gonçalves, 2008). As duas construções levaram à formação de moléculas com resíduos de cisteínas livres que podem ou não estar interferindo na atividade das moléculas, No presente projeto iremos aprofundar esses estudos realizando uma mutação sítio dirigida, mutando o resíduo de cisteína livre por um de alanina na molécula DisBa(Δ1-32). A nova molécula, chamada de DisBa(Δ1-32)C8A será estudada para avaliação de sua atividade na adesão celular e comparada com a atividade observada na molécula DisBa(Δ1-32). (AU)