Clonagem para expressão da proteína do retardo mental do X Frágil (FMRP)

• Processo: 09/51178-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Luciana Amaral Haddad
• Beneficiário: Daniel Varajão de Latorre
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Síndrome do cromossomo X frágil Expressão gênica Processamento alternativo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Alca Variavel | Dominio Kh | Exon 12 | Fmrp | Interacao Fmrp-Rna | Splincing

Resumo

A síndrome do X frágil é a forma mais comum de retardo mental hereditário e decorre da ausência da proteína do retardo mental do X frágil (FMRP). A FMRP, expressa principalmente no encéfalo e nas gônadas, possui dois domínios KH e uma caixa RGG, reconhecidos por intermediar interações entre proteína e RNA. A FMRP liga-se de maneira específica a mRNAs, que contenham um quarteto G ou a estrutura SoSLIP, via caixa RGG, e ao complexo em beijo, via o segundo domínio KH (KH2). A interação da FMRP com seus alvos leva em geral a repressão da tradução destes. O gene que codifica para a FMRP, o Fmrl, possui 17 éxons e está sujeito a splicing alternativo nos éxons 12,14,15 e 17. O KH2 da FMRP é codificado pelos éxons 9 ao 13. O segmento expresso na FMRP pelos éxons 10 ao 12 compõe a alça variável do KH2, cuja função permanece desconhecida. O splicing alternativo do éxon 12 do Fmr1 altera o comprimento da alça variável do KH2 da FMRP pela inclusão/exclusão de 21 aminoácidos. Buscando compreender a função do segmento codificado pelo éxon 12 do Fmr1 pretendemos produzir neste projeto clones para a expressão da FMRP e seus alvos. Serão clonadas uma sequência do Fmr1 que expressa todos os éxons e outra que difere desta por não conter a sequência codificada pelo éxon 12. Também serão produzidos, in vitro, alguns mRNAs alvos da FMRP para que futuramente seja verificada a interação entre as isoformas e os alvos produzidos. (AU)