Estudos estruturais de duas enzimas envolvidas na biosíntese de goma xilelana produzida pela bactéria Xylella fastidiosa

• Processo: 01/09703-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Glaucius Oliva
• Beneficiário: Claudia Aparecida Alves
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/14138-2 - Center for Structural Molecular Biotechnology, AP.CEPID
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cvc | Estrutura | Goma Xilelana | Inibidor | Xylella Fastidiosa

Resumo

O objetivo principal do projeto apresentado aqui será o de estudar duas enzimas envolvidas na via metabólica da goma xilelana, produzida pela bactéria Xylella fastidiosa, agente patogênico da Clorose Variegada de Citrus (CVC ou amarelinho). Estudos recentes tem evidenciado a importância da síntese de exopolisacarídeo (goma) na patogenicidade de outras bactérias. O desenvolvimento deste plano de trabalho terá duas abordagens que esperamos sejam as melhores para a formação da aluna e para obtenção de resultados. O projeto envolverá o estudo estrutural de uma das proteínas da via (uma glicosiltransferase chamada de GumH) que já teve seu gene clonado em vetor de expressão, a proteína foi expressa e protocolos de purificação foram estabelecidos. Assim, testes de cristalização da proteína serão iniciados e a partir dos cristais obtidos será determinada a estrutura tridimensional da enzima GumH através da técnica de difração de raios-X. Ó outro enfoque do projeto será o de estudar desde a clonagem, expressão, purificação, cristalização e determinação da estrutura de outra enzima (GumM) envolvida na biosíntese da goma xilelana. Os resultados obtidos nestes estudos contribuirão para o melhor conhecimento da via biosintética da goma e poderão ser amplamente utilizadas no planejamento racional de moléculas inibidoras, com potencial uso aplicado no controle da doença CVC in vivo. (AU)