Caracterização do mecanismo de estímulo da síntese do proteoglicano de heparam sulfato em células endoteliais, pela heparina.

• Processo: 99/12955-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Helena Bonciani Nader
• Beneficiário: Edvaldo da Silva Trindade
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 95/04624-9 - Atividades biológicas dos proteoglicanos, AP.TEM
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Heparam Sulfato | Heparina | Matriz Extracelular | Proteoglicanos | Transducao De Sinal | Trombose

Resumo

A heparina estimula de um modo específico, a síntese de proteoglicano composto por heparan sulfato (PGHS) e também altera a estrutura de suas cadeias de heparam sulfato, em células endoteliais. Drogas antitrombóticas, em geral, também apresentam o efeito estimulatório na síntese de PGHS. Diversos trabalhos sugerem a ligação da heparina a possíveis receptores presentes na superfície celular. Para caracterizar a ligação da heparina nas células endoteliais, a heparina foi marcada com biotina. A distribuição da heparina biotinilada na célula foi visualizada após a exposição da heparina biotinilada sendo sua presença revelada com estreptavidina conjugada com marcador fluorescente. Através da microscópia confocal, heparina foi detectada somente na matriz extracelular e não na superfície da célula. Utilizando concomitantemente, anticorpo específico para superfície celular, anti-sindecan, e heparina, observou-se que o anti-sindecan marcou a superfície, enquanto a heparina ligou somente na matriz extracelular. No entanto, quando a heparina foi adicionada à cultura e mantida over-night, ela foi internalizada. Os dados mostraram qge a heparina biotinilada mantém a capacidade de estimular a síntese de PGHS. Assim, o presente trabalho, tem por objetivo, o estudo do mecanismo pelo qual a heparina estimula a síntese de PGHS em células endoteliais. (AU)