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Investigação em escala genômica do reparo de lesões oxidativas em leveduras

Processo: 01/08832-8
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Mestrado
Data de Início da vigência: 01 de março de 2002
Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2003
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
Pesquisador responsável:Luis Eduardo Soares Netto
Beneficiário:Bruno Brasil Horta
Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:95/09710-0 - Oxidação de proteínas e atividade antioxidante da enzima 'Thiol Specific Antioxidant' (TSA), AP.JP
Assunto(s):Estresse oxidativo   Radicais livres   Reparo do DNA   Genômica funcional
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:C8-Metilguanina | Estresse Oxidativo | Genomico | Radical Livre | Reparo

Resumo

Diversas lesões oxidativas podem ser geradas em biomoléculas como o DNA, proteínas e lipídeos, através de mecanismos que envolvem a formação de espécies reativas de oxigênio e radicais livres centrados no carbono. C8-metilguanina é utilizada como um marcador da ação de radicais livres centrados no carbono. Esta lesão pode ser detectada por HPLC com detecção eletroquímica (Gomes e co1., 1995). Pretendemos verificar se existem mecanismos de reparo de C8-metilguanina, o que seria uma indicação da importância dessa lesão in vivo e, conseqüentemente, da ação deletéria de radicais livres centrados no carbono em DNA de células. Pretendemos Identificar enzimas com atividade C8-metilguanína glicosilase, utilizando técnicas de genômica funcional, mais especificamente genômica bioquímica. Outra possibilidade de estudo é a possível formação de 2-metilhistidina, através de uma possível alquilação da posição 2 do anel imidazólico semelhantemente ao que ocorre na formação de 8-metilpurinas durante ataque por radicais livres centrados no carbono. Caso este produto seja formado, poderemos estudar o seu reparo utilizando a técnica de genômica bioquímica. Utilizaremos como modelo de estudo de células eucarióticas a levedura Saccharomyces cerevisiae que representa diversas vantagens práticas, como a facilidade de manipulação genética, além de ter sido amplamente estudada e possuir metodologias em escala genômica recentemente desenvolvidas. (AU)

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