Determinação de um possível método para a quantificação de enzimas proteolíticas secretadas por bactérias de interesse biotecnológico através da utilização de substratos de fluorescência apagada

• Processo: 98/00524-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 1998
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2000
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Pesquisador responsável: Ivo Lebrun
• Beneficiário: Elen Aquino Perpetuo
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Enzimas proteolíticas Substratos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Quantification | Substrate | Tetanus Toxin

Resumo

Atualmente a quantificação da toxina tetânica é feita através do ensino de limite de Floculação (Lf), que determina a quantidade de toxina produzida pela imunoprecipitação com um antissoro padrão utilizando duas séries de diluições sucessivas. Este método, embora internacionalmente aceito possui vários inconvenientes, podendo haver precipitação inespecífica. O ensaio é demorado e a sensibilidade é baixa. Sendo assim com base nas informações sobre o mecanismo de ação enzimático da toxina tetânica, procuraremos estudar um possível método de quantificação mais sensível e especifico, através da utilização de substratos peptídicos com apagamento intermolecular, desenhados a partir da sequência da sinaptobrevina, que contém a ligação peptídica susceptível a enzima. Devido à importância da toxina tetânica na produção de vacinas, e como estudo mais intensivo nas neurotoxinas clostridiais, é importante que se desenvolva um método de quantificação de toxina mais sensível, especifico e rápido. (AU)