Investigação das interações envolvidas na montagem do filamento fino de músculos esqueléticos: utilizando mutantes de tropomiosina marcados fluorescentemente na região COOH-terminal

• Processo: 00/00686-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2000
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2001
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Shaker Chuck Farah
• Beneficiário: Aurea Denise de Sousa Soller Ferreira
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Contracao Muscular | Filamento Fino | Fluorescencia | Polimerizacao | Tropomiosina

Resumo

Visando estudar as interações da tropomiosina (Tm) com outras proteínas que compõem o filamento fino de músculos esqueléticos, construímos quinze mutantes de Tm contendo triptofano ou análogos de triptofano que funcionam como sondas fluorescentes. Esses aminoácidos podem ter sua fluorescência sensível às alterações no ambiente químico no qual está inserido na proteína, sendo uma boa ferramenta para estudos de modificações conformacionais e/ou intrações entre proteínas. Três mutantes construídos mostraram-se boas ferramentas para o estudo dessas interações. O projeto propõe dois estudos básicos: (i) a obtenção de dados experimentais para a montagem de um ciclo termodinâmico para as principais interações do filamento fino e (ii) o estudo quantitativo do fenômeno de polimerização da Tm. O estudo (i) é interessante porque nenhum grupo conseguiu obter diretamente valores para todas as interações referidas. O estudo (ii) é inédito, já que não são descritos na literatura detalhes quantitativos da polimerização da Tm (ie constante de afinidade, tamanho médio do polímero). Visando obter os controles que achamos necessários, propomos a construção e caracterização de mais dois mutantes de Tm. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

FERREIRA, Aurea Denise de Sousa Soller. Tropomiosinas contendo 5-hidroxitriptofano: sondas especificas para interações no filamento fino. 2002. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.