Estudo de alterações nucleares induzidas por drogas aneugênicas em células em cultura e sua associação com apoptose

• Processo: 00/08911-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2000
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Glaucia Maria Machado Santelli
• Beneficiário: Elly Kayoko Nakagawa
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Apoptose Cultura de células Ensaio cometa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Apoptose | Cultura De Celulas | Drogas Aneugenicas | Hoechst E Tunel | Teste Cometa

Resumo

Dados anteriores de nosso laboratório mostraram que o tratamento de células em cultura com drogas aneugênicas (colchicina, vincristina) induz micronúcleos e apoptose. Paralelamente a estes efeitos, as drogas induzem, ainda, o aparecimento de brotos nucleares e células multinucleadas. A análise da cinética do aparecimento destes efeitos mostrou que a apoptose é mais tardia em relação ao micronúcleo, mas não esclarece se as células multinucleadas estariam associadas a apoptose. No presente projeto propomo-nos a padronizar a técnica do cometa para identificar células em apoptose, uma vez que esta técnica possibilita a visualização da fragmentação de DNA e da forma do núcleo. A validação da técnica do cometa para apoptose será feita pela comparação com outros métodos como Hoechst e Tunel. A desvantagem destes métodos é que o primeiro permite identificar o núcleo com corpos apoptóticos e o segundo regiões de quebra simples de DNA. (AU)