Estudo da relação entre as variações na sequência de DNA e no padrão de expressão do gene da obesidade com a deposição de gordura na carcaça de bovinos de diferentes tamanhos à maturidade

• Processo: 00/03509-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Antonio Carlos Silveira
• Beneficiário: Ana Karina Dias Salman
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 99/05195-5 - Crescimento de bovinos de corte no modelo biológico superprecoce, AP.TEM
• Assunto(s): Obesidade Carcaça Bovinos Expressão gênica Polimorfismo genético Polimorfismo de fragmento de restrição Polimorfismo conformacional de fita simples
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bovinos | Expressao Genica | Gene Da Obesidade | Leptina | Polimorfismo

Resumo

Com o objetivo de identificar a existência de polimorfismo e avaliar o padrão de expressão do gene da obesidade, bem como determinar a freqüência dos alelos na população estudada, será conduzido experimento com 30 bezerros mestiços oriundos do cruzamento de fêmeas Nelore com touros de raças de diferentes tamanhos à maturidade para a colheita de amostras de tecido adiposo e sangue, as quais serão utilizadas para extração de DNA e RNA. A existência de polimorfismo será determinada pelas técnicas de RFLP (Restriction Fragment Lenght Polimorphism), e SSCP (Single Strand Conformation Polimorphism). Os alelos identificados serão danados em vetores T e seqüenciados com kit BigDay-Terminator (ABI) em seqüenciador automático. ABI 377 (peckin-Elmer). O RNA total será extraído segundo a metodologia descrita por LOUVEAU et al. (1991). As amostras de RNA total serão fixadas em membranas de náilon e, posteriormente, serão hibridizadas com fragmentos de DNA do gene da obesidade marcado com P32. As membranas hibridizadas serão expostas a filmes de raio-X e o RNA m será quantificado por densitometria, mediante a leitura da intensidade dos sinais obtidos nas radiografias. Dentro de cada raça estudada, as quantidades de RNAm da leptina serão correlacionadas com a espessura de gordura na carcaça. (AU)