Clonagem molecular e expressão do fator hemorrágico HF3, uma metaloendopeptidase isolada do veneno da serpente Bothrops jararaca

• Processo: 99/00562-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 1999
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2001
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Solange Maria de Toledo Serrano
• Beneficiário: Carlos Alberto da Silva
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Clonagem Serpentes Venenos de serpentes Bothrops jararaca Expressão de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Clonagem | Expressao | Metaloendopeptidase | Serpente | Veneno

Resumo

O envenenamento pela serpente Bothrops jararaca é caracterizado por intensas reações locais que incluem edema, hemorragia e necrose tecidual. O veneno contém diversas enzimas proteolíticas e, dentre as já isoladas e caracterizadas, o fator hemorrágico HF3 é a metaloendopeptidase com mais alta atividade hemorrágica. Além da hemorragia, o HF3 causa também mionecrose local. A comparação de algumas propriedades bioquímicas do HF3 com outras metaloendopeptidases sugere que esta seja composta pelos domínios: pro-proteína, enzimático, desintegrina e C-terminal rico em cisteínas (classe III das reprolisinas). Os objetivos do presente projeto são: 1- Clonagem molecular e análise da seqüência de um cDNA que codifique o fator hemorrágico HF3. 2- Obtenção do pro-HF3 recombinante com o objetivo de analisar seu processamento in vitro. 3- Expressão dos domínios (enzimático, e desintegrina até C-terminal) do HF3 para avaliar seus papéis nos eventos que levam à hemorragia. (AU)