Estudos de expressao genica diferencial e interferencia funcional na investigacao do papel da miosina-v na progressao tumoral em melanoma maligno.

• Processo: 01/12211-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2002
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Enilza Maria Espreafico
• Beneficiário: Daniel Maragno Trindade
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Adesão celular Melanoma Apoptose Citoesqueleto
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Adesao Celular | Apoptose | Citoesqueleto | Melanoma Maligno | Miosina V | Processo Tumoral

Resumo

A miosina-Va é um motor molecular baseado em actina envolvido em uma diversidade de funções celulares, tais como polarização celular, crescimento de dendritos, transporte e fusão de organelas, associação com centrossomo e fuso mitótico e envolvimento na sinalização dependente de cálcio. Evidência recente indica que ela seqüestra o fator pró-apoptótico Bmf, liberando-o diante da perda de adesão celular. O presente projeto tem como objetivos centrais analisar a expressão e a atuação da miosina V, assim como a expressão de outros genes funcionalmente relacionados a esta miosina, na progressão tumoral, utilizando como modelo experimental linhagens celulares derivadas de melanoma humano e de camundongo de diferentes estágios da progressão tumoral. Estudos em progresso em nosso laboratório mostram aumento da quantidade de mRNA e proteína miosina-Va em uma linhagem de melanoma mestátatico em relação à linhagem de melanoma primário da qual o primeiro foi derivado. Por transfecção introduziremos a miosina-Va inteira em células de melanoma mutantes S91, que são não-metastáticas e sensíveis à anoikis, visando isolar clones expressando miosina-Va e analisá-los quanto à resistência à anoikis e capacidade metastática. Utilizaremos também duas construções da cauda para interferir com a função da miosina-Va endógena de melanomas metastáticos e analisaremos estas células quanto à expressão de moléculas na superfície, migração e invasão in vitro. (AU)