Regulação da expressão e caracterização de tiorredoxina peroxidase mitocondrial

• Processo: 01/13747-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Luis Eduardo Soares Netto
• Beneficiário: Gisele Monteiro
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 95/09710-0 - Oxidação de proteínas e atividade antioxidante da enzima 'Thiol Specific Antioxidant' (TSA), AP.JP
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Atividade Com Ascorbato | Cristalografia | Estudo Do Promotor | Microarray

Resumo

Tiorredoxina peroxidase mitocondrial (mTPxl) possui uma regulação transcricional complexa dependente de dois fatores celulares: o estado redox intracelular e a fonte de carbono ao qual a levedura está exposta. Identificamos dois fatores de transcrição responsáveis por essas induções: Haplp e Msn2p/Msn4p. Nosso objetivo será caracterizar melhor a região promotora de mTPxl e determinar regiões importantes para essa induções. Além disso, realizaremos experimentos a'e gel shift com os fatores de transcrição descritos acima. Temos interesse também na atividade e estrutura de mTPxl. Pretendemos resolver a estrutura tridimensional dessa enzima num trabalho em colaboração com o LNLS. Já realizamos os primeiros screenings para cristalização da proteína e obtivemos uma condição onde se formou um esferolito (agregação cristalina não organizada). Continuaremos tentando obter o cristal de mTPxl (já conseguimos padronizar a purificação e obter grandes montantes de proteína pura). Quanto à atividade de mTPxl estamos caracterizando uma nova atividade ainda não descrita para nenhuma peroxiredoxina, a qual mTPxl aceitaria ascorbato como agente redutor. Atualmente estamos realizando estudos sobre o envolvimento de mTPxl na proteção a permeabilização transitória da mitocôndria (PTM), fenômeno celular induzido por cálcio e estresse oxidativo. Pretendemos realizar estudos de microarray para observarmos a resposta celular ao PTM. (AU)