Efeitos da isoprenalina e da forscolina sobre a mobilizacao de ca+2 em celulas endoteliais de ratos.

• Processo: 04/14059-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2005
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Geral
• Pesquisador responsável: Lusiane Maria Bendhack
• Beneficiário: Mário dos Anjos Neto Filho
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 02/00949-6 - Estudo de nitrosilos de rutênio capazes de liberar NO por fotoindução e medida de sua atividade biológica e aplicação em terapia fotodinâmica, AP.TEM
• Assunto(s): Endotélio Óxido nítrico sintase tipo III Forscolina Cálcio
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Calcio | Endotelio | Enos | Forscolina | Isoprenalina | Pka

Resumo

Em células endoteliais a ativação da enzima adenilato-ciclase (AC) aumenta a produção de AMPc. No endotélio, o AMPc pode ativar a proteína quinase A (PKA), a qual fosforila canais de cálcio voltagem-dependente na membrana plasmática (influxo de cálcio) além de receptores de rianodina e de IP3 no reticulo sarcoplasmático (liberação dos estoques de cálcio). O aumento da concentração citoplasmática de cálcio favorece a formação do complexo cálcio-calmodulina, ativando a enzima NO-sintase com conseqüente produção de NO. Nossa hipótese é de que isoprenalina (agonista beta-adrenérgico) ou a forscolina (ativador direto da adenilato-ciclase) poderiam ativar a via acima descrita em células endoteliais de aorta de ratos. Para testar nossa hipótese, verificaremos se o aumento da concentração de cálcio estimulado com isoprenalina ou forscolina em células endoteliais de aorta de ratos ocorre por influxo de cálcio extracelular ou por liberação de estoques do reticulo sarcoplasmático. Verificaremos também se a isoprenalina ou a forscolina são capazes de ativar o acoplamento Adenilato-ciclase - AMPc - PKA resultando na produção de NO em células endoteliais de ratos. Nossas ferramentas farmacológicas serão: verapamil (bloqueador de canais de cálcio tipo VOC na membrana plasmática); 2 -aminoetoxidifenil borato (2-APB) (antagonista de receptores de IP3); tetracaína (antagonista de recptores de rianodina); KT5720 inibidor da PKA; L-NNA inibidor da enzima NO-sintase. (AU)