Influencias da metilacao e da acetilacao na expressao genica de celulas progenitoras hematopoeticas.

• Processo: 05/50563-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2005
• Data de Término da vigência: 15 de maio de 2008
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Marco Antonio Zago
• Beneficiário: Dalila Luciola Zanette
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/14247-6 - Center for Research on Cell-Based Therapy, AP.CEPID
• Assunto(s): Metilação de DNA Análise serial da expressão gênica (SAGE) Expressão gênica Cromatina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Acetilacao De Histonas | Celulas-Tronco Hemapoeticas | Cromatina | Expressao Genica | Metilacao De Dna | Sage

Resumo

A expressão de um gene inicia-se pela ligação de fatores de transcrição à região promotora e é modulada por fatores genéticos e epigenéticos. Estes últimos incluem a metilação do DNA e alterações na estrutura da cromatina. Vários estudos apontam grande potencial de diferenciação para as células progenitoras hematopoéticas (CD34+) derivadas de medula óssea de adultos. Estas células mantêm uma estrutura de cromatina aberta que resulta no potencial de auto-renovação e diferenciação, progressivamente perdido à medida que elas se diferenciam porque a cromatina fica menos acessível aos fatores de transcrição. O comportamento de uma célula pode ser modificado pela acetilação de histonas e metilação do DNA. O objetivo deste trabalho é identificar novos genes cuja expressão seja controlada por mecanismos epigenéticos em células CD34+ obtidas a partir de amostras de medula óssea normal de doadores do setor de transplantes do Hospital das Clínicas da FMRP-USP. Estas células serão tratadas com 5-aza-desoxicitidina e tricostatina, agentes com ação desmetilante e inibidora de histona-desacetilases, respectivamente, que poderiam reativar a expressão de genes silenciados. Os genes expressos, nestas células serão comparados com aqueles de células-controle utilizando a análise serial da expressão gênica (SAGE) e confirmados por RT-PCR semi-quantitativa. Além disso serão verificados os efeitos destes fármacos sobra a diferenciação destas células in vitro. (AU)