Caracterização da interação entre o metilossomo e o nucleocapsídeo do vírus respiratório sincicial humano.

Autor(es)

Juliana Kaori Ogawa

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: São Paulo.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI)
• Data de defesa: 2016-12-07

Membros da banca

Armando Morais Ventura; Viviane Fongaro Botosso; Bryan Eric Strauss

• Orientador: Armando Morais Ventura

Resumo

Neste projeto caracterizamos a interação da nucleoproteína viral (N) do Vírus Respiratório Sincicial Humano (HRSV) com as proteínas PRMT5 e WDR77, que constituem o metilosomo celular. Confirmamos que essa interação ocorre através de co-imunoprecipitação em células humanas, e de interação in vitro dessas proteínas purificadas. Demonstramos a co-localização dessas proteínas na célula através de microscopias de imunofluorescência e confocal. Inibindo ou aumentando a expressão de PRMT5 não observamos impacto na replicação viral. Verificamos que ocorre metilação em N tanto em resíduos de argininas como de lisinas, com anticorpos específicos para essas modificações, e por espectrometria de massas, indicando significado funcional. Com essa evidência testamos o efeito de inibidores de metilação e demetilação, em argininas e lisinas. Obtivemos efeito inibitório significativo da replicação do HRSV com um inibidor de metilação de lisina, UNC0646, indicando que a interação N-metilossomo tem potencial como alvo terapêutico contra HRSV. (AU)

• Processo FAPESP: 14/03944-2 - Caracterização da interação entre o metilossomo e o nucleocapsídeo do vírus respiratório sincicial humano
• Beneficiário: Juliana Kaori Ogawa
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado