Regulação de proteínas fosfatases envolvidas em câncer: estudos estruturais da TIPRL e interação com a proteína fosfatase 2A = Regulation of protein phosphatases involved in cancer: structural studies of TIPRL and its interaction with protein phosphatase 2A

Autor(es)

Valéria Scorsato

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2015-08-25

Membros da banca

Ricardo Aparicio; João Renato Carvalho Muniz; Marcio Chaim Bajgelman; Celso Eduardo Benedetti; Leandro Martínez

• Orientador: Ricardo Aparicio

Resumo

O câncer é um conjunto de doenças de proliferação celular descontrolada cuja incidência na população mundial cresce continuamente ano após ano, atingindo índices alarmantes. A origem dos diversos tipos de câncer está em alterações genéticas e metabólicas das células, dentre as quais se destacam as alterações na sinalização celular mediada pela fosforilação reversível de proteínas, um processo altamente regulado por proteínas quinases e fosfatases. Neste trabalho, foram estudadas as fosfatases humanas PP2A e PTP1B. A proteína tirosina fosfatase PTP1B é superexpressa em tumores e está envolvida no câncer e em outras doenças como resistência a insulina e diabetes tipo 2, sendo considerada um bom alvo para o desenvolvimento de novas drogas. Nessa direção, foram analisadas várias séries de pequenas moléculas quanto à capacidade inibitória, tendo sido realizados esforços na obtenção de complexos cristalográficos. A PP2A é uma serina-treonina fosfatase que atua na célula como um importante supressor tumoral, exercendo sua atividade na forma de heterotrímeros formados por uma subunidade catalítica (PP2Ac), uma de ancoragem (PR65/A) e uma subunidade reguladora variável pertencente a uma dentre quatro famílias distintas (B/B¿/B" e striatins). O processo de montagem desses heterotrímeros é fortemente regulado por outras proteínas, e envolve modificações pós-traducionais no extremo C-terminal da PP2Ac em um processo conhecido como biogênese da PP2A. A proteína TIPRL inibe a atividade de PP2A e há evidências de que atue em algum ponto do processo de biogênese. Esta tese reporta avanços significativos no estudo da TIPRL e sua interação com a PP2Ac, dentre eles, a estrutura cristalográfica da TIPRL, determinada a partir de proteína marcada com Se-Met, uma vez que não havia qualquer informação estrutural disponível nos bancos de dados, que pudesse ser utilizada para Substituição Molecular. A estrutura apresenta um novo tipo de enovelamento e um inesperado sítio de interação com o C-terminal da PP2A, conforme indicam nossos estudos, realizados por mutagênese sítio-dirigida, pulldown e análise de troca hidrogênio/deutério acoplada a espectrometria de massas. Esses resultados permitiram, pela primeira vez, propor uma função biológica para a TIPRL na biogênese da PP2A (AU)

• Processo FAPESP: 11/03054-9 - Caracterização estrutural das fosfatases humanas PTP-1B e PP2A, envolvidas em câncer, e suas interações com inibidores
• Beneficiário: Valeria Scorsato
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto