Validação de uma metodologia molecular para identificação de fungos e investigação in vitro da transição dimórfica em Candida albicans

Autor(es)

Adolfo José da Mota

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: São Paulo.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Biociências (IBIOC/SB)
• Data de defesa: 2012-04-25

Membros da banca

Francisco Gorgonio da Nobrega; Valderez Gambale; Eduardo Gorab; Marcelo Afonso Vallim

• Orientador: Francisco Gorgonio da Nobrega

Resumo

A classificação de fungos microscópicos é limitada pela escassez de detalhes morfológicos e incertezas na caracterização bioquímica. Nesse trabalho desenvolvemos um método simples, baseado na amplificação de um segmento de cerca de 2.800 bares de bases seguida de digestão com DdeI e análise do padrão após eletroforese em agarose. Demonstramos que o método discrimina tão bem quanto a sequência de DNA do segmento após analisar mais de 400 amostras que foram classificadas em 33 espécies. Essa tecnologia facilita a busca por novos representantes da imensa diversidade existente, espécies que podem ser exploradas quanto ao seu valor potencial para a medicina e a indústria. Outras metodologias moleculares foram desenvolvidas para discriminar entre espécies próximas e na identificação de novas espécies. Em seguida, o trabalho esteve voltado para o desenvolvimento de um ensaio laboratorial que nos permitisse estudar a transição dimórfica em Candida albicans. Desenvolvemos dois novos ensaios, um biológico e outro sobre membrana artificial, para estudar a indução ou inibição da produção de hifas. A expressão de genes associados ao processo foi acompanhada de maneira quantitativa. Fracionando cromatograficamente o soro fetal bovino, obtivemos resultados indicativos de frações estimuladoras e inibidoras da transição morfológica. (AU)

• Processo FAPESP: 08/50204-3 - Validacao de uma metodologia molecular para identificacao de candida spp e busca do componente do soro que induz a transicao dimorfica em candida albicans.
• Beneficiário: Adolfo Jose da Mota
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado