microRNA-148a regula citocinas inflamatórias e atividade microbicida na leishmaniose canina

Autor(es)

Gabriela Torres Rebech

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Araçatuba. 2022-04-20.
• Instituição: Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Medicina Veterinária. Araçatuba
• Data de defesa: 2022-04-08
• Orientador: Valéria Marçal Felix de Lima

Resumo

A leishmaniose canina (LCan) é um grave problema de saúde pública, pois animais infectados facilitam a transmissão do protozoário Leishmania para humanos pela picada do vetor flebotomíneo durante o repasto sanguíneo. A progressão da LCan está relacionada à supressão efetiva da resposta imune, possivelmente associada a pequenos RNAs chamados microRNAs (miR), que podem afetar a tradução do mRNA em proteínas e, consequentemente, regular o funcionamento das células. O aumento de miR-148a em leucócitos esplênicos (LS) de cães com LCan foi observado em estudos anteriores e análises in silico identificaram possíveis vias envolvidas na regulação da resposta imune que são afetadas por este miR. Portanto, através do uso de cultura celular e transfecção, in vitro, avaliamos o envolvimento de miR-148a, na regulação de citocinas inflamatórias como TNF-α, IL-6, IL-12, IL-1β, iNOS, expressão de MHCII, CD80, CD3, dos fatores de transcrição T-bet (Th1) e GATA-3 (Th2) e sua relação com a carga parasitária em LS de cães com LCan. Primeiramente, LS coletados de cães saudáveis e doentes (LCan), foram transfectados com oligonucleotídeos inventariados de inibidor e mimetizador de miR-148a. Após 48 horas, a expressão das proteínas MHCII, CD80, iNOS, CD3, Tbet, GATA-3 foi avaliada por citometria de fluxo e a concentração de TNF-α, IL-12, IL-6 e IL-1β foi medida no sobrenadante de cultura por ELISA de captura. A transfecção de LS com mimetizador de miR-148a diminuiu a concetração de iNOS nas células e de TNF-α, IL-6 e IL-12 no sobrenadante do LS cultivado de cães LCan. Curiosamente, a transfecção com inibidor de miR-148a diminuiu a carga parasitária nas células. Esses resultados sugerem um papel regulador negativo deste miR na resposta imune à infecção por L. infantum. Concluímos que miR-148a pode afetar a resposta imune regulando citocinas inflamatórias durante LCan. Nossos resultados contribuem para o entendimento da complexa interação hospedeiro/parasito na leishmaniose canina e podem auxiliar no desenvolvimento de possíveis tratamentos. (AU)

• Processo FAPESP: 19/04240-2 - MiRNA148a na regulação da reposta imunológica de leucócitos esplênicos na Leishmaniose Visceral Canina
• Beneficiário: Gabriela Torres Rebech
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado