Papel do exercício físico na regulação da proteína MKP-3 em hipotálamo de camundongos obesos: efeitos sobre a sinalização da insulina = Role of physical exercise in the regulation of MKP-3 protein in hypothalamic of obese mammals: effects on insulin signaling

Autor(es)

Bárbara de Almeida Rodrigues

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Limeira, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Aplicadas
• Data de defesa: 2017-10-26

Membros da banca

José Rodrigo Pauli; André Ricardo Gomes de Proença; Vania D'Almeida; Leandro Fernandes; Maria Cláudia Gonçalves de Oliveira

• Orientador: José Rodrigo Pauli; Leandro Pereira de Moura

Resumo

A ação da insulina no hipotálamo é crucial para o controle da ingestão alimentar. No estado alimentado a insulina é secretada e atinge o hipotálamo fosforilando e extruindo do núcleo a proteína FoxO1 (fator de transcrição da família forkhead BOX O), diminuindo a transcrição de neuropeptídeos orexigênicos (NPY, neuropeptídeo Y e peptídeo relacionado ao gene agouti, AgRP). Ao contrário, quando há prejuízos na transdução do sinal da insulina FoxO1 permanece no núcleo das células neuronais elevando a síntese de neuripeptídeos orexigênicos e com isso há o aumento da fome. Nesse contexto, a proteína MAPK-fosfatase-3 (MKP-3) tem a habilidade de desfosforilar FoxO1, permanecendo no núcleo, induzindo aumento de NPY e AgRP no hipotálamo e consequentemente causando hiperfagia e aumento da massa corporal adiposa. Portanto, ações terapêuticas capazes de ter efeito inibitório sobre a MKP-3 em células neurônais do hipotálamo podem se revelar como importantes agentes contra a obesidade e co-morbidades. O objetivo do presente estudo foi verificar os efeitos do exercício físico sobre o conteúdo proteico de MKP-3 e sinalização da insulina em hipotálamo de camundongos obesos induzidos por dieta rica em gordura saturada. Foram utilizados camundongos Swiss distribuídos em grupos: Controle, alimentados com uma ração padrão para roedores, Obesos (OB), alimentados com dieta rica em gordura saturada e Obesos exercitados agudamente (OBEXE). Após as análises de composição corpórea e ingestão alimentar, foram identificadas as proteínas de interesse da cascata de sinalização de insulina através da técnica de Western Blot. Foram também realizados ensaios com células HEK293 e camundongos Swiss controle com e sem adminsitração de adenovírus para superexpressar MKP-3 e avaliar os efeitos sobre a ingestão alimentar e fosforilação de FoxO1. Para identificar a ação da fosfatase MKP-3 em desfosforilar FoxO1 foi utilizado células HEK293 tratadas ou não com insulina e um vetor adenoviral de MKP-3 e GFP (controle) injetado intracerebroventricular (i.c.v) em camundongos, após os tratamentos as análises moleculares foram feita através da técnica de Westen Blot. Verifica-se através dos resultados que a obesidade aumentou o conteúdo proteíco de MKP-3 no hipotálamo e isso foi acompanhado por aumento na ingestão alimentar e adiposidade corporal dos camungondos. Os experimentos com adenovíruos mostraram que a super expressão de MKP-3 causa a desfoforilação da FoxO1 e prejuízo no controle da fome estimulado por insulina. Entretanto, foi observado aumento do exercício físico sobre a proteína MKP-3 hipotalâmica. Conclui-se que a condição de obesidade está associada com aumento nos níveis de MKP-3 no hipotálamo e isso está associado com hiperfagia. O exercício físico não foi capaz de inibir a atividade desta proteína em desfoforilar o fator transcricional FoxO1 no hipotálamo. Intervenções capazes de inibir a MKP-3 podem se tornar estratégias relevantes no tratamento da obesidade (AU)

• Processo FAPESP: 13/25512-4 - Papel do exercício físico na regulação da proteína MKP-3 em hipotálamo de ratos obesos: efeitos sobre a sinalização da insulina.
• Beneficiário: Barbara de Almeida Rodrigues
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado