Homocisteina: desenvolvimento de um novo metodo de analise utilizando o sistema DIMP/T&R-MIMS

Autor(es)

Renato Haddad

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Médicas
• Data de defesa: 2001-07-11

Membros da banca

Nelci Fenalti Höehr; Jose Antonio Rocha Gontijo

• Orientador: Marcos Nogueira Eberlin; Nelci Fenalti Höehr

Resumo

Neste projeto de pesquisa foi desenvolvido um novo método para determinação e quantificação da homocisteína em plasma, intermediária da síntese de cisteína, que é produzida no organismo a partir da metionina. Este novo método emprega a Espectrometria de Massa por Introdução via Membrana (MIMS). Utilizou-se uma sonda de membrana DIMP (Sonda de membrana com inserção direta) operando no método T&R¿MIMS (aprisionamento e liberação - Espectrometria de Massa por Introdução via Membrana) que amostra os compostos por um determinado período de tempo por adsorção em uma membrana de silicone, seguida de rápida dessorção através do aquecimento da membrana. A análise de homocisteína foi realizada com derivatização por esterificação, adicionando-se cloroformiato de etila, em solvente contendo piridina, etanol e água. Os experimentos foram realizados em um espectrometro de massas monoquadrupolar, operando em modo SIM (monitoramento de íons selecionados). Foi monitorado o íon de m/z 234 que corresponde ao fragmento [M-H]+ da homocisteína. Testes de linearidade mostraram um coeficiente de correlação de 0,998. O sistema se mostrou bastante reprodutível e um experimento no qual foram realizadas cinco repetições apresentou desvio de 2,5%. A recuperação foi de 97,4%, e limitre de detecção de 2?M o que demonstra que o método é viável para a análise de homocisteína (AU)

• Processo FAPESP: 00/03258-9 - Desenvolvimento de um método para quantificação rápida de homocisteína em fluídos biológicos
• Beneficiário: Renato Haddad
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado