Potencial da associação de peptídeos antimicrobianos com inativação fotodinâmica contra Candida albicans

Autor(es)

Nathália dos Santos Fusco

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Araraquara. 2022-08-02.
• Instituição: Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Odontologia. Araraquara
• Data de defesa: 2022-06-08
• Orientador: Livia Nordi Dovigo

Resumo

A capacidade que um microrganismo possui de resistir a efeitos de fármacos que anteriormente eram capazes de eliminá-lo é chamada de resistência microbiana. Devido ao fato deste fenômeno crescer a cada dia, tratamentos alternativos são extremamente necessários. A inativação fotodinâmica (do inglês, photodynamic inactivation - PDI) e sua associação com peptídeos antimicrobianos (PAMs) são opções promissoras para inativação de microrganismos patogênicos, entretanto são escassos os estudos associando este tema contra biofilmes microbianos, além disso, não há relatos na literatura associando o peptídeo melitina com o fotossensibilizador curcumina. Portanto, este estudo teve como objetivo analisar a eficácia dessas associações para efeito antimicrobiano por meio da realização de dois estudos. O primeiro trabalho tratou-se de uma revisão bibliográfica para mapeamento da literatura existente acerca da associação de PDI e PAMs, utilizando de uma busca sistemática para a seleção dos artigos. Trinta e nove artigos foram identificados por meio das buscas em bases de dados. Com exceção de cinco associações, a grande maioria apresentou eficácia antimicrobiana contra diversos microrganismos, susceptíveis e resistentes. O segundo estudo conduzido tratou-se de uma pesquisa laboratorial com o objetivo de avaliar a eficácia do PAM melitina em associação com a PDI mediada pela curcumina contra cepas de Candida albicans suscetível e resistente ao fluconazol. Foram utilizadas duas cepas de referência (suscetível e resistente ao fluconazol) e dois isolados clínicos com resistência ao fluconazol. A concentração fungicida mínima (CFM) e a concentração inibitória mínima (CIM) da melitina sozinha foram avaliadas para as quatro cepas. A partir de então foi realizada a caracterização fotofísica da curcumina na presença e ausência da melitina. Análises do efeito antimicrobiano em amostras planctônicas e de biofilme apenas das cepas de referência foram realizadas. Por fim, as amostras de biofilme foram analisadas em microscopia confocal para avaliar a quantidade de curcumina internalizada nos biofilmes em diferentes tempos de exposição com a melitina+curcumina. Os dados foram analisados com estatística descritiva e inferencial, de acordo com o delineamento experimental de cada etapa (α=0,05). A CIM da melitina foi diferente para cada cepa (ATCC 90028 - 16μg/mL; ATCC 96901 - 62μg/mL; e ambos os isolados clínicos 31 μg/mL). Em relação às avaliações da atividade antifúngica do PAM em associação com a PDI, para ATCC 90028 no formato planctônico, tanto a curcumina quanto a melitina promoveram redução dos valores de log (p<0,0001) . Quando as amostras permaneceram no escuro, apenas a melitina produziu efeito na viabilidade (p≤0,023). Quando em biofilme, houve redução na viabilidade promovida pela melitina com exposição a luz (p<0,0001). Para a cepa ATCC 96901, em formato planctônico, houve redução nos valores de log quando expostas a luz para os fatores curcumina e melitina sozinhos. Quanto ao biofilme, em nenhuma condição efeito significativo nas contagens de colônias viáveis. Assim conclui-se que a associação da PDI com peptídeos é capaz de promover redução da viabilidade de microrganismos patogênicos e, especificamente, a associação melitina+curcumina deve ser mais investigada a fim de se potencializar o efeito da associação contra cepas de Candida. (AU)

• Processo FAPESP: 20/10200-0 - Potencial antifúngico do peptídeo LL-37 sobre C. albicans susceptível e resistente ao fluconazol e efeito de sua associação com tratamento fotodinâmico mediado pela curcumina
• Beneficiário: Nathália dos Santos Fusco
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado