Caracterização fenotípica e genotípica de Streptococcus mutans presentes em infecções endodônticas

Autor(es)

Augusto Rodrigues Lima

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2021-05-21

Membros da banca

Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes; Felipe Nogueira Anacleto; Flaviana Bombarda de Andrade Ferreira; Caio Cezar Randi Ferraz; Marina Angélica Marciano

• Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes

Resumo

Streptococcus mutans desempenha um papel importante na etiologia da cárie e, eventualmente, nas infecções sistêmicas. Além disso, é freqüentemente encontrado nos diferentes tipos de infecção endodôntica. Porém, as características fisiopatológicas do S. mutans encontrado nesse microambiente com características especificas ainda são desconhecidas. Sendo assim, este trabalho teve como objetivos a detectação e a caracterização do S. mutans presente em diferentes tipos de infecções endodônticas, seja crônica ou aguda de natureza primária ou secundária. Métodos: O DNA bacteriano foi extraído de amostras coletadas de 10 pacientes com necrose pulpar associada a evidências radiográficas de periodontite apical e de 10 pacientes que necessitaram de terapia endodôntica devido à presença de necrose pulpar e abscesso apical agudo. O grupo controle consistiu de 10 pacientes com dentes com polpa vital normal e necessitando de tratamento endodôntico por razões protéticas. A presença de S. mutans foi detectada por PCR quantitativo em tempo real (qPCR) usando primers espécie-específicos. As amostras que abrigaram S. mutans também foram avaliadas quanto à presença dos genes cnm/cbm por qPCR (artigo 1). Já no segundo artigo, 14 cepas foram isoladas e analisadas a partir de coletas microbiológicas de 10 pacientes com infecção endodôntica primária e 10 pacientes com infecção endodôntica secundária/persistente. A identificação de S. mutans foi feita através de PCR e sequenciamento do genoma completo, também foram realizados ensaios de crescimento e sobrevivência ao estresse oxidativo e baixo pH, além de ensaios de proteção antibiótica e infecção por Galleria mellonella (artigo 2). Resultados: Todos os sítios estudados apresentaram alta prevalência de S. mutans (60 a 70%), exceto o grupo controle. O gene cnm foi detectado apenas nas amostras de canais radiculares de dentes necróticos de pacientes assintomáticos associados a lesão periapical radiográfica (66,6%). O artigo 2 os isolados clínicos foram hipersensíveis ao peróxido de hidrogênio. Notavelmente, todas as 14 cepas abrigaram e expressaram o Cbm, mostrando ligação aumentada ao colágeno, virulência sistêmica aumentada em G. mellonella e capacidade de invadir células endoteliais de artéria coronária humana e fibroblastos da polpa dental (artigo 2). Conclusao: O gene cnm foi detectado em infecções primárias crônicas, através de qPCR. Além disso, foi possível isolar S. mutans de infecções endodônticas primárias e secundárias, cepas virulentas de S. mutans (Cbm-positivas) (AU)

• Processo FAPESP: 16/23950-2 - Monitoramento do conteúdo infeccioso, endotóxico e da presença de genes de resistência a antibióticos de infecções primárias sintomáticas e assintomáticas durante a terapia endodôntica
• Beneficiário: Augusto Rodrigues Lima
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado