Caracterização de alvos moleculares envolvidos na resistência quimioterápica e no metabolismo tumoral de células de câncer de pulmão

Autor(es)

Ana Paula Morelli

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Limeira, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Aplicadas
• Data de defesa: 2022-06-21

Membros da banca

Fernando Moreira Simabuco; Ana Paula Lepique; Carlos Kiyoshi Katashima

• Orientador: Fernando Moreira Simabuco

Resumo

O câncer é considerado a principal causa de morte no mundo e um dos maiores desafios da saúde pública global. O câncer de pulmão é a segunda principal causa de morte por câncer em todo o mundo, o que é fortemente relacionado ao diagnóstico tardio e baixa eficácia terapêutica. A cirurgia é o tratamento de base para pacientes em estágio I e II de câncer de pulmão classificados como NSCLC e, na impossibilidade de ressecção cirúrgica, as estratégias terapêuticas incluem quimioterapia à base de cisplatina e imunoterapias, como pembrolizumabe e avelumabe. A cisplatina é um dos fármacos antineoplásicos mais eficazes, porém está extremamente associado à resistência inata e adquirida ao tratamento. Sabe-se que algumas características moleculares, como a expressão aumentada e diminuída de proteínas, estão associadas à melhora ou piora da progressão, sensibilidade ao tratamento e desfecho da doença. Neste trabalho, usando primariamente uma análise proteômica, identificamos alvos importantes e vias de sinalização alteradas em células de adenocarcinoma de pulmão A549 resistentes à cisplatina. Dentre os alvos que apresentaram expressão aumentada na condição resistente, optamos por caracterizar STAT3 e PCNA. Apesar de STAT3 já ser descrita como um fator correlacionado à resistência à cisplatina, pouco se descreve a respeito de PCNA, a relação entre ambas as proteínas e a via de mTOR, importante na resposta terapêutica do câncer. Sabe-se que a via de mTOR está constantemente aumentada em diferentes tipos de câncer e que este fator impacta no desfecho terapêutico da doença. Aqui mostramos, através da combinação de diferentes técnicas como knockout mediado por CRISPR, superexpressão e ensaios funcionais, que a perda de função parcial de PCNA e a ablação de STAT3 diminuiu a sobrevivência clonogênica e sensibilizou as células A549 à cisplatina. Especificamente para STAT3, a ablação resultou na diminuição do fenótipo mesenquimal, observada pelo potencial clonogênico e pela análise da expressão de marcadores de transição epitelial-mesenquimal. Ainda mais, as células knockout para STAT3 não adquiriram a superativação da via mTOR induzida pela resistência à cisplatina e foram mais responsivas à inibição do mTOR pela rapamicina. Isso demonstra que a combinação de rapamicina e cisplatina é ainda mais potente na ausência de STAT3. Especificamente para PCNA, a perda funcional parcial sensibiliza à cisplatina enquanto aumenta a expressão de yH2AX, um importante marcador de reconhecimento de danos no DNA. Além disso, a superexpressão de PCNA aumenta a fosforilação de STAT3. Aqui sugerimos que o PCNA participa da resistência à cisplatina tanto pela suscetibilidade ao dano do DNA via yH2AX como pela relação com STAT3. Por fim, demonstramos que a capacidade de resposta à cisplatina pode ser dependente do crosstalk entre STAT3, PCNA e mTOR, além da inibição sinérgica de STAT3 e mTOR ser possivelmente uma abordagem potencial contra o câncer de pulmão (AU)

• Processo FAPESP: 19/00607-9 - Caracterização de alvos moleculares envolvidos na resistência quimioterápica e no metabolismo tumoral de células de câncer de pulmão
• Beneficiário: Ana Paula Morelli
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado