Avaliação dos efeitos da criopreservação do sêmen bovino quanto à motilidade, viabilidade espermática, integridade acrossômica e função mitocondrial determinadas por citometria de fluxo

Resumo

Este experimento será realizado utilizando-se 8 touros cruzados submetidos, cada um, a dez colheitas de sêmen em vagina artificial. Logo após a colheita o sêmen será avaliado quanto volume, concentração, motilidade espermática, realizada por sistema computadorizado (CASA), função mitocondrial, avaliada utilizando-se o corante iodeto de 5,5',6,6' - tetracloro - 1,1,3,3' - tetraetilbenzimidazolilcarbocianina (JC-1) (GRAVANCE et al., 2000) e Rodamina 123 (123), viabilidade espermática e integridade acrossômica associando-se as sondas: iodeto de propídio (PI), identifica as células mortas, corando-as de vermelho, e fluoresceína conjugada com aglutinina de Pisum sativum (FITC-PSA), para verificar integridade de acrossomo (CASEY et al., 1993), avaliados em citometria de fluxo. Após as avaliações o sêmen será crio preservado em palhetas de 0,5 mL com uma concentração de 50 x 106 espermatozóides. O sêmen será criopreservado em dois diluidores diferentes, o Tris (diluidor com duas frações A e B) e o Tes (diluidor de fração única). Após a criopreservação o sêmen será analisado quanto à motilidade, função mitocondrial, viabilidade espermática e integridade de acrossomo, como descrito anteriormente, além de ser submetido ao teste de termorresistência rápida, realizado de acordo com ARRUDA et al. (1992), sendo imediatamente avaliado quanto aos mesmos parâmetros citados anteriormente (motilidade espermática, função mitocondrial, viabilidade espermática e integridade acrossômica). (AU)