Papel dos resíduos positivamente carregados nas funções farmacológicas de PLA2s de serpentes e sinovial humana

Resumo

As fosfolipases A2 (EC 3.1.1.4; PLA2) são enzimas que catalisam a hidrólise das pontes ácido-éster na posição sn-2 dos fosfolipídeos e, liberam como produtos da catálise ácido graxo e lisofosfolipídeos. Muitas PLA2s do veneno de serpentes apresentam propriedades farmacológicas que não dependem da atividade catalítica para serem manifestadas, como as variantes do grupo II, PLA2 Lys49. Muitas extrapolações foram feitas com a utilização de peptídeos sintéticos das regiões protéicas com o objetivo de identificar "clusters" responsáveis pelas funções farmacológicas. Por mapeamento de superfície pretendemos analisar as seqüências de outros grupos de PLA2 com o objetivo de identificar resíduos que possam ser os determinantes estruturais das atividades farmacológicas de PLA2 e através de mutagênese, expressão e redobramento de BthTX-I recombinante, avaliarmos o efeito das mutações sobre suas funções. O fato da PLA2 sinovial humana possuir um grande número de resíduos carregados positivamente, tanto quanto as variantes sem atividade hidrolítica, levou-nos a supor uma provável importância destas cargas nos processos inflamatórios. Através de mutagênese, os "clusters" de resíduos identificados na análise computacional serão estudados para avaliarmos a relevância ou não destes resíduos nos efeitos farmacológicos desta proteína. (AU)