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Criacao de uma endoxilanase termoestavel atraves da evolucao molecular "in vitro".

Processo: 01/08012-0
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2001
Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2005
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica
Pesquisador responsável:Richard John Ward
Beneficiário:Roberto Ruller
Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Endo-1,4-beta-xilanases   Biotecnologia   Espectroscopia   Biologia molecular
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Biologia Molecular | Biotecnologia | Espectroscopia | Xilanases

Resumo

O projeto propõe o uso de uma nova técnica denominada de evolução dirigia ou evolução molecular "in vitro" de biomoléculas a qual permite uma modificação rápida de proteínas através da seleção de características de interesse. A partir da utilização de uma biblioteca de mutações aleatórias de um gene produzido por "error prone PCR", pode-se subseqüentemente selecionar mutantes com propriedades desejadas. Será adotada como modelo de estudo uma proteína com característica mesoestável (endoxylanase A do B. subtilis, uma enzima com aplicações industriais) com o objetivo da sua evolução gradual "in vitro" até o desenvolvimento de característica termoestável. A estratégia permitirá um estudo detalhado de mapeamento molecular que identificará a base estrutural da termo estabilidade protéica. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
FERREIRA, TATIANA LOPES; RULLER, ROBERTO; CHIOATO, LUCIMARA; WARD, RICHARD J.. Insights on calcium-independent phospholipid membrane damage by Lys49-PLA(2) using tryptophan scanning mutagenesis of bothropstoxin-I from Bothrops jararacussu. Biochimie, v. 90, n. 9, p. 1397-1406, . (01/00279-8, 02/12746-2, 01/08012-0)
MURAKAMI‚ M.T.; ARNI‚ R.K.; VIEIRA‚ D.S.; DEGRÈVE‚ L.; RULLER‚ R.; WARD‚ R.J.. Correlation of temperature induced conformation change with optimum catalytic activity in the recombinant G/11 xylanase A from Bacillus subtilis strain 168 (1A1). FEBS Letters, v. 579, n. 28, p. 6505-6510, . (03/13082-3, 01/08012-0, 03/01457-2)