Mutagênese da proteína HBx do vírus da Hepatite B e caracterização da sua interação com RNA

Resumo

Hepatites B é uma das principais doenças humanas. Um problema de saúde pública global sério. Apesar de vacinas eficientes, contra hepatite B, estarem disponíveis desde 1982 ela ainda infecta aproximadamente 2 bilhões pessoas, mais de 350 milhões são portadores crônicos. Esta doença mata cerca de um milhão de pessoas cada ano (WHO, 2000). Uma das proteínas deste vírus, a HBx, está envolvida na progressão de hepatites crônicas para o carcinoma hepatocelular (HCC). Apesar dos efeitos pleiotrópicos descritos para esta proteína, a sua função exata permanece obscura. Nossa descoberta, que HBx liga-se preferencialmente a uma certa região de mRNAs, levantou a questão se há outros motivos de mRNA reconhecidos por HBx. O principal objetivo deste projeto é identificar mRNAs humanos que possam se ligar a HBx em ensaios in vitro. Para responder esta questão pensamos empregar uma técnica de seleção randômica de mRNA baseado na interação RNA-proteína, em seguida pretendemos criar uma biblioteca de cDNA para isolar e identificar esses genes. Visamos colaborar para uma melhor compreensão das possíveis formas que a HBx pode induzir ó HCC. Posteriormente investigaremos a estabilidade dessas interações mRNA-HBx por meio de mutações introduzidas pontualmente no cDNA que codifica HBx. (AU)