Estudo dos mecanismos de resposta ao dano induzido no DNA pela radiação ionizante e cisplatina em linhagens de fibroblastos humanos

Resumo

A radiação ionizante e a cisplatina causam danos no DNA, alterando a expressão de vários genes envolvidos na resposta ao dano. Os mecanismos de reparo recombinacional homólogo (HRR) e reparo por excisão de nucleotídeos (NER) são ativados para reparar as quebras duplas e os crosslinks intra e inter-cadeias causados por esses agentes. O projeto propõe a análise dos perfis de expressão gênica diferencial pelo método de cDNA microarrays, em resposta à radiação ionizante e à cisplatina em fibroblastos humanos normais, AT (ataxia telangiectasia) e XPA (xeroderma pigmentosum, grupo A). As trocas entre cromátides irmãs (SCEs) estão correlacionadas ao processo de recombinação, e portanto, pretende-se avaliar a freqüência destas, o que fornecerá informações complementares úteis para a interpretação dos resultados de expressão gênica. Da mesma forma, pretende-se estudar a indução de apoptose após o tratamento com a radiação ionizante e com a cisplatina. Assim, o projeto visa esclarecer os efeitos de dois agentes indutores de dano na molécula de DNA em células humanas, possibilitando a compreensão de como estes interagem com o material genético, alterando a expressão de grupos de genes e modificando outros processos, que posteriormente poderão ser estudados com mais detalhe. Além disso, a determinação do status dos mecanismos de HRR e NER em células AT e XPA também podem fornecer novos "insights" nesses mecanismos. (AU)