Proteínas quinases envolvidas na regulação do estresse em Trypanosoma

Resumo

Resultados preliminares de nosso laboratório mostraram que a rapamicina inibe o crescimento de Trypanosoma. A análise de seqüências destes organismos indicou a existência, de proteínas semelhantes à TOR (Target of Rapamycin) envolvidas na sinalização do controle de crescimento através da regulação da tradução em muitos eucariotos. Encontramos também proteínas semelhantes a FKBP12 e a Raptor, que participam desta via de sinalização. Estas observações sugerem a existência de uma via de sinalização mediada por TOR nesses parasitas. Assim, procuraremos neste projeto verificar e caracterizar esta via de sinalização. Mais especificamente pretendemos: 1) Estudar o efeito de rapamicina no controle da transcrição, da tradução e diferenciação do T. cruzi e T. brucei, e detectar as modificações celulares induzidas pela droga. 2) Detectar a presença das potenciais TOR, FKBP12 e Raptor, através de anticorpos específicos, sua expressão e a associação entre elas durante o ciclo de vida dos parasitas ou na presença de rapamicina ou em diferentes condições nutricionais. 3) Verificar o papel dessas proteínas no crescimento e diferenciação através de ensaios de interferência de RNA (em T. brucei) e nocaute (em T. cruzi). Estes estudos permitirão entender os mecanismos de controle do crescimento destes parasitas, importante não só para o conhecimento da sua biologia, mas para identificação de novos alvos para quimioterapia das doenças por eles causadas. (AU)