Análise qualitativa e quantitativa de hormônios hipofisários recombinantes por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC)

Resumo

A prolactina humana (hPRL), um hormônio que apresenta inúmeras ações biológicas, está atualmente em fase de testes clínicos para várias aplicações terapêuticas (Soares e cols. Biotechnol Appl Biochem 2000; 32:127-135). São metas do presente projeto a obtenção de vetores bacterianos para expressão de hPRL no periplasma, baseados em promotor ativado pela temperatura (Lambda PL), melhorando os rendimentos de secreção e permitindo sua utilização farmacêutica. Esses vetores após mutagênese sitio-dirigida também serviram para a obtenção e purificação, em escala laboratorial, dos antagonistas de prolactina (hPRL-S179D e hPRL-G129R). Estes análogos, juntamente com as isoformas recombinantes produzidas em célula CHO: NG-hPRL e G-hPRL (já purificadas, porém em pequenas quantidades em nosso laboratório) e da isoforma hPRL 11-199 (purificada no presente projeto), estão sendo caracterizadas quanto a sua ação proliferativa e antiproliferativa em linhagens celulares humanas de câncer de mama (T47D e MCF-7). Há bastante expectativa com relação à ação antitumoral destes antagonistas de prolactina, cuja ação específica contra o câncer de mama e de próstata já foi demonstrada. A esperança é obter uma ação antiproliferativa com relação às células cancerosas prolactino-dependentes análoga àquela já obtida com Tamoxifeno relativamente às células estrógeno-dependentes. (AU)