Producao e aplicacao diagnostica de polipeptideos recombinantes derivados da proteina e de flavivirus do complexo da encefalite japonesa.

Resumo

Os vírus da família Flaviridae e pertencentes ao gênero Flavivirus são arbovírus de grande importância em saúde pública, com altas taxas de morbidade e mortalidade em países tropicais. No Brasil é descrita a ocorrência de 11 flavivirus, sendo que 6 destes estão filogeneticamente relacionados ao Complexo da Encefalite Japonesa, responsável por infecções que podem acometer o sistema nervoso central causando encefalite. Dentre eles, destacam-se o vírus da Encefalite de Saint Louis (SLEV), recentemente isolado no estado de São Paulo e o vírus Rocio (ROCV), que foi responsável por um importante surto epidêmico no Vale do Ribeira, na década de 70. Além disso, outro vírus deste complexo que merece atenção é o West Nile (WNV), que foi recentemente introduzido nos Estados Unidos, tendo se espalhado por toda a América do Norte e migrado rumo sul, já ocorrendo evidências sorológicas da presença deste patógeno na Colômbia, o que aumenta o risco de sua introdução no Brasil. A provável introdução do WNV e a re-emergência das infecções causadas pelo SLEV e ROCV sustentam a realização de estudos epidemiológicos e moleculares destes vírus visando à prevenção de futuras epidemias. Assim, pretende-se com este trabalho produzir polipeptídeos recombinantes contendo o domínio III, um dos principais sítios imunogênicos da proteína E destes vírus. Estes polipeptídeos serão utilizados como antígenos em métodos de diagnóstico sorológico, como os imunoenzimáticos. Também, a capacidade imunogênica destes polipeptídios será avaliada em camundongos. A produção dos polipeptídeos recombinantes será feita clonando-se e expressando-se os genes codificadores do domínio III da proteína E de SLEV, ROCV e WNV. Os polipeptídeos expressos em Escherichia coli contendo aproximadamente 100 aminoácidos, serão purificados e utilizados na padronização de testes diagnósticos. Métodos diagnósticos assim padronizados serão utilizados em estudos soro-epidemiológicos em seres humanos e em eqüídeos.