Regulacao da h+atpase vacuolar de celulas de tubulos proximais de ratos por canais de cloreto.

Resumo

A H+-ATPase vacuolar é um transportador de H+ encontrado em um grande número de organelas subcelulares, onde promove acidificação do interior vesicular, e em membranas apicais de tecidos epiteliais, tais como túbulos renais. Considerando que o mecanismo de transporte por esta ATPase é eletrogênico, a entrada de H+ para o interior de vesículas torna o lúmen das mesmas mais positivo, criando um gradiente eletroquímico desfavorável ao ulterior transporte de H+. Assim, uma condutância paralela a CI- prove um desvio elétrico compensatório para as cargas positivas transferidas pela bomba, dissipando a DP estabelecida pela ATPase. Apesar da associação entre H+-ATPase e canais de CI- ter sido confirmada em muitos sistemas, há ainda muita controvérsia em relação à identidade molecular das proteínas que promovem o transporte de CI-. O propósito deste trabalho será investigar o papel dos canais de CI- CFTR e CIC-5 na modulação da atividade da H+-ATPase em células IRPTC, já que até o momento nenhuma definição do tipo de canal foi inferida. O objetivo é promover um “knock-out” gênico através de RNA de interferência para os possíveis canais e observar seus efeitos sobre a atividade da H+-ATPase. Pretendemos também verificar qual ou quais canais estão envolvidos com o efeito estimulatório da ANG II sobre a H+-ATPase. (AU)