Tipagem de cepas de actinobacillus actinomycetemcomitans isoladas de pacientes com doenca periodontal por pfge e sua relacao com os fatores de virulencia.

Resumo

O presente estudo tem por objetivo investigar a diversidade genética, por PFGE, de cepas de Actinobacillus actinomycetemcomitans isoladas de pacientes com doença periodontal e a sua correlação com fatores de virulência. Serão analisadas 50 cepas de A. actinomycetemcomitans isoladas de indivíduos com diferentes condições clinicas, de diferentes localizações geográficas; das quais cepas já isoladas no Brasil de pacientes com doença periodontal. Também serão analisadas outras cepas de A. actinomycetemcomitans provenientes de diferentes países: Suécia, Quênia, Japão e EUA. A reação de amplificação da região que codifica o gene 16S rRNA será realizada inicialmente para a confirmação da identidade das amostras. A tipagem bacteriana será realizada pela eletroforese em campo pulsado (PFGE) após digestão do DNA cromossômico com as enzimas de restrição Xhol e Sse83871. O polimorfismo das cepas de A. actinomycetemcomitans será relacionado aos seguintes fatores: aspectos clínicos periodontais dos pacientes; origem geográfica; características fenotípicas como atividade tóxica distensora citoletal e capacidade de invasão em células KB; e polimorfismo de genes que codificam fatores de virulência como aae (que codifica uma adesina), apaH (que codifica uma nudix hidrolase) e das regiões promotoras de cdt (que codifica a toxina distensora citoleral) e Ikt (que codifica a leucotoxina), analisados no projeto temático. (AU)