Caracterizacao de um clone que expressa adesao agregativa, derivado de uma amostra de escherichia coli uropatogenica.

Resumo

Escherichia coli é o principal agente de infecção urinaria sintomática (E. coli uropatogênica - UPEC) na comunidade, sendo, em geral, proveniente da microbiota fecal do próprio paciente. Em estudos anteriores, demonstramos que algumas UPEC apresentam marcadores genotípicos e fenotípicos de E. coli enteroagregativa (EAEC). EAEC, por sua vez, compreende um importante patotipo, agente de diarréia persistente, que é identificado pela capacidade de produzir um padrão característico de adesão em células cultivadas in vitro (adesão agregativa, AA). Entretanto, amostras de EAEC apresentam grande diversidade de adesinas e outros determinantes potenciais de virulência. Além disto, algumas amostras desse patotipo não provocam diarréia em voluntários. Recentemente, na tentativa de identificar uma nova adesina associada ao padrão AA em amostras de UPEC, utilizamos o DNA genômico de uma amostra selecionada (UPEC-46), desprovida de adesinas conhecidas, para a construção de uma biblioteca em cosmidio. Esta abordagem resultou na obtenção de 4 clones produtores de AA. Um desses clones (C1002), contendo inserto de ~30kb, foi sub-clonado, resultando em um sub-clone (C1002-H64) com inserto de ~21kb. Neste projeto, pretendemos identificar a adesina responsável pelo fenótipo AA na UPEC-46, por meio da análise genética do sub-clone C1002-H64. (AU)